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产品基本信息

基因基本信息

BRCA1位于人类第17号染色体长臂21.31区段（17q21.31）,包含22个编码外显子,是第一个被发现的遗传性乳腺癌和卵巢癌易感基因。BRCA1基因的临床意义远超其名称所暗示的“乳腺癌”范畴，是一种广谱的基因组守护者，其功能缺失不仅导致乳腺癌和卵巢癌的高风险，还与前列腺癌、胰腺癌、结肠癌等多种恶性肿瘤的发生相关。更重要的是，BRCA1缺陷所导致的同源重组修复功能障碍，为PARP抑制剂这类靶向药物的开发提供了“合成致死”的理论基础。对BRCA1基因组区域进行测序分析后发现，该区域含有约41.5%的Alu重复序列，这一密度在人类基因组中属于异常高水平，这种高Alu密度具有重要的功能后果，Alu元件之间的非等位同源重组（NAHR）可导致大片段缺失、重复和插入，成为BRCA1结构性变异的重要来源，约10–15%的遗传性乳腺癌患者中可检测到由Alu介导的BRCA1大片段重排。

BRCA1蛋白是多结构域蛋白质，其功能依赖于多个保守结构域与其他蛋白质的相互作用。RING指结构域位于蛋白质的N端，是BRCA1与BARD1形成异二聚体的关键区域，具有E3泛素连接酶活性，催化底物蛋白的泛素化修饰，在DNA损伤应答的早期信号传导中发挥重要作用。RING结构域的错义突变（如Cys61Gly）可破坏其锌指结构，导致BRCA1功能丧失。

核定位信号（NLS） 使BRCA1能够在细胞核内富集，这是其发挥DNA修复功能的前提。BRCA1蛋白包含多个NLS序列，分布于不同区域。

BRCT结构域位于蛋白质的C端，由两个串联重复序列构成，中间由22个氨基酸的链接区连接。BRCT结构域是BRCA1功能的核心枢纽，它通过识别磷酸化丝氨酸-XX-苯丙氨酸（pSer-X-X-Phe）基序，与多种磷酸化蛋白质结合，包括解旋酶BACH1（BRIP1）、CtIP和Abraxas/CCDC98等。这些相互作用使BRCA1能够被招募到DNA损伤位点，并组织修复复合体的组装。BRCT结构域的突变（如M1775K）可破坏其磷酸肽结合能力，从而损害BRCA1的DNA损伤应答功能。

转座子系统介绍

睡美人（Sleeping Beauty，SB）转座子系统是1997年由Ivics等人从鱼类基因组中“复活”的一种Tc1/mariner样DNA转座子，是首个在脊椎动物中实现可控转座的人工转座系统。它由转座酶基因和两侧的反向重复序列（IR/DR）构成，通过“剪切-粘贴”机制将外源基因稳定整合至宿主基因组的TA二核苷酸位点。经过二十余年的定向进化改造，SB转座酶的活性较原始版本提升了超过100倍，在哺乳动物细胞中的基因转移效率接近病毒载体水平。SB转座子系统由两个核心组件构成：转座酶（transposase） 和转座子（transposon），通过 “剪切-粘贴”转座机制实现目的基因整合在基因组，对于≤10kb的基因表达都有很高的转座效率。