SF9 (昆虫卵巢细胞)
SF9 (昆虫卵巢细胞)细胞是源于雌性草地贪夜蛾蛹的卵巢组织,可以用于复制杆状病毒表达载体。SF9细胞表达水平高(特别是细胞内蛋白),较快的生长速度,有效的蛋白折叠,广泛的翻译后修饰,糖基化与哺乳动物细胞类似,相对容易地酶促的去糖基化(对于蛋白结构测定有利),在V LPs表达中被广泛使用。
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| 细胞别称 | SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9; Spodoptera frugiperda clone 9; Sf clone 9; IPLB-Sf-9AE; IPLB-SF-9AE; IPLB-SF-9; IPLB-Sf-9; IPLB-Sf9 |
| 细胞来源 | 卵巢 |
| 细胞形态 | 规则的带有颗粒球形 |
| 细胞类型 | 自发永生化细胞 |
| 生长特性 | 半贴半悬 |
| 安全等级 | BSL1 |
| 包装规格 | T25瓶或者1mL冻存管包装 |
| 倍增时间 | 2~3天 |
| 传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-1711 DSMZ; ACC-125 ECACC; 89070101 |
【培养保存】
培养体系:TNM-FH+10% FBS+1% P/S
培养条件:气相:空气,;温度:28℃
冻存条件:基础培养基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
注意:该细胞为28℃培养,不通二氧化碳,请提前准备专用培养箱。
【传代步骤】
当细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
(1).将所有细胞全部收集在15ml离心管中,
(2).在1000RPM条件下离心5分钟
(3).弃去上清液,加入完全培养基后吹匀;
(4).收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新培养基的25瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:3的比例进行。
注:悬浮细胞需要双倍体积来培养,sf9最适的pH6.2,温度27~28℃。
【冻存步骤】
(1).细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入3ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数;
(2).5min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10(6)/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识;
(3).将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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