MDA-MB-468(人乳腺癌细胞)
MDA-MB-468(人乳腺癌细胞)人乳腺癌细胞系,于1970年由美国MD安德森癌症中心肿瘤细胞系资源库分离。它属于HER-2阳性三阴性乳腺癌,具有高度侵袭性和转移性,未受药物治疗前可持续生长,因此被认为是研究癌症治疗的理想试验对象之一。
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| 细胞别称 | MDA-MB 468; MDA-MB468; MDAMB468; MDA-468; MDA468; MB468; MD Anderson-Metastatic Breast-468 |
| 细胞来源 | 乳腺腺癌; |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 安全等级 | BSL1 |
| 包装规格 | T25瓶或者1mL冻存管包装 |
| 倍增时间 | 2~3天 |
| 传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
| 保藏机构 | ATCC |
【培养保存】
培养体系:L15+10% FBS+1% P/S
培养条件:气相:空气,100%,5%;温度:37℃
冻存条件:基础培养基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
注意:L15培养基不需要5%二氧化碳,使用37度培养箱空气培养即可; 细胞生长偏慢,注意控制细胞密度不要过低;
【传代步骤】
当细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次;
2.加1ml消化液于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化2-4分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加胰酶3倍体积的培养基终止消化;
3.用巴氏管轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加入培养液后吹匀;
4.收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。
【冻存步骤】
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入3ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数;
2.5min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10(6)/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识;
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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