AGS人胃腺癌细胞【STR鉴定正确】

一、常温细胞处理方法

1、收到常温细胞后，及时拍照并记录有无漏液、瓶身破损现象；

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，在显微镜下观察细胞状态。先不打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内平衡复温2-4小时，稳定细胞状态；

3、细胞稳定后，仔细阅读本说明书，了解细胞生长特性、培养体系、冻存条件、传代步骤等相关信息；

4、吸走大部分培养基离心备用，留10-12 ml培养基，拍照并观察细胞。若细胞密度高于80%，可吸走培养基进行传代；若密度低于80%，则留10-12 ml继续培养至密度高于80%后再传代；

5、T25瓶首次传代建议按1:2比例进行，即1个T25瓶传为2瓶。

二、冻存细胞处理方法

1、收到细胞后，开箱拍照，将冻存管置于冰上核对细胞信息，同时观察冻存管是否完好、有无解冻情况；

2、若收到细胞当天不复苏，需及时将细胞转移至液氮罐（过程需迅速，避免细胞离开低温区域）；若无液氮罐，可短时间保存在- 80℃冰箱，长期保存仍需置于液氮罐；

3、提前准备适合该细胞生长的培养基，从冰箱取出后需恢复至室温再使用；

4、复苏1管至1个T25瓶或6 cm培养皿中。复苏后可取少量细胞计数并检测活力。

三、注意事项

1、若培养瓶或冻存管出现破损、漏液，及时拍照联系销售反馈，按指导处理；仅外包装破损一般不影响使用；

2、细胞增殖较快，发货细胞量较多时培养基可能变黄。使用此类培养基时，需及时观察颜色变化，缩短换液周期，每瓶多加2-3 ml培养基；

3、若无法观察到细胞，建议收集培养基，1200rpm离心5分钟，观察细胞沉淀量，并用少量培养基重悬沉淀，取部分悬液至计数板或载玻片观察；

4、本公司提供细胞株技术服务及相应费用，提供完善技术支持和售后服务，收到产品后的处理方式及售后条款参见《细胞售后条例》。

四、细胞复苏

1、将水浴锅预热至37℃，在无菌离心管中提前加入4 ml培养基待用；

2、从液氮罐或-80℃冰箱中取出需复苏的细胞，将细胞冻存管迅速没入水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，溶解时间约1-2分钟；

3、在超净台中将融化的细胞悬液加入装有4 ml培养基的离心管，1000 rpm（约300 g离心力）离心5分钟，弃上清；

4、用适量完全培养基重悬细胞，转移至T25细胞培养瓶，补充培养基至5 ml，放入培养箱培养，第二天观察细胞状态和密度。

五、细胞传代

当细胞密度大于80%时即可进行传代培养，步骤如下：

1、尽量吸净T25瓶中的原培养基；

2、加入3-4ml常温不含钙、镁离子的PBS，轻轻润洗细胞1-2次后吸走PBS；

3、向T25瓶中加入1ml含EDTA的胰酶，轻轻晃动培养瓶，使胰酶均匀分布于瓶底细胞层；

4、将培养瓶放入37℃培养箱消化；

5、待细胞变圆并开始脱落时，加入1 ml完全培养基终止消化；

6、轻轻吹打使细胞脱落，转移至无菌的5 ml离心管，1000rpm离心5分钟，弃上清；

7、加入新的完全培养基轻轻重悬细胞，将细胞转移到新的培养瓶中并摇匀，加入5 ml完全培养基培养；

8、消化时间：不同品牌胰酶消化时间不同，需注意控制

9、传代比例：1:2-1:4（具体根据细胞生长速度及密度调整）

10、换液频次：2-3天

六、细胞售后条例

1、购买的冻存细胞发2管，先复苏第一管，再视情况复苏第二管；

2、复苏第一管出现问题，联系我方分析原因并指导复苏第二管；在技术支持下仍无法存活的，可重发常温细胞；重发冻存细胞需加收干冰费用（需及时拍照反馈）；

3、冻存细胞发货2支为同一批次，一管复苏成功另一管失败的，不予重发；

4、收到冻存细胞复苏后状态良好，但因用户自身操作导致细胞污染、状态不佳、冻存后复苏失败的，不予免费重发；

5、细胞运输途中出现冻存管破损、融化等问题，予以重发（需及时拍照反馈）；

6、因外源试剂导致细胞培养出现问题或污染的，不予重发；

7、细胞复苏和培养过程中出现问题，反馈不及时（默认收到细胞后一周内无反馈）且无法提供复苏后状态图片的，不予免费重发；

8、非细胞出厂质量问题，因客户自身操作导致细胞死亡的，自收货日起一个月内可申请低价二次购买折扣（原代细胞除外）；

9、细胞相关实验受培养基及血清品牌、操作习惯、培养瓶品牌等多种因素影响，因非细胞鉴定问题导致实验数据不理想的，不予退换细胞；

10、细胞系与对应专用培养基一起购买的，自收货日起一个月内可享受无条件售后（原代细胞不参与）；

11、请保留细胞 / 培养基标签上的二维码，需售后或技术支持时可联系相关二维码。