GC-plenti-SFFV-Bcl3（Mouse)-Flag-P2A-puro
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过表达慢病毒产品信息
| 产品名称 | GC-plenti-SFFV-Bcl3（Mouse)-Flag-P2A-puro | ||
| 基因名称 | Bcl3 | 物种 | 小鼠（Mouse) |
| 基因全称 | B cell leukemia/lymphoma 3 | 基因转录本 | NM_033601.3 |
| 基因别称 | Bcl-3 | 表达蛋白 | NP_291079.2 |
| 基因ID | 12051 | 转录本长度 | 1344bp |
| 荧光表达 | 无 | 筛选标记 | Puro |
基因基本信息
Bcl3（B-cell lymphoma 3）基因位于第7号染色体，编码一种非典型IκB家族蛋白，在NF-κB信号通路中扮演独特的双重调控角色。与经典IκB蛋白不同，Bcl3主要定位于细胞核，核心结构特征是包含7个串联的锚蛋白重复序列（Ankyrin repeats），重复序列构成了蛋白-蛋白相互作用的结构基础，介导Bcl3与NF-κB p50（NFKB1）和p52（NFKB2）同源二聚体的特异性结合通过与p50和p52同源二聚体结合，发挥转录共激活或共抑制功能。
Bcl3的中央区域由 7个串联的锚蛋白重复序列构成，。这个ARD域是Bcl3实现其功能的基础，主要负责介导蛋白质与蛋白质之间的相互作用，特别是与NF-κB家族成员结合，第一个和第二个锚蛋白重复序列附近的一个短小结构域内，为淋巴细胞存活结构域。Bcl3的N端和C端都包含转录激活域。当Bcl3与DNA上的p50或p52同源二聚体结合后，这两个末端区域能够招募共激活因子（如CBP/p300），从而将原本抑制转录的复合物转变为激活状态。Bcl3的N端包含一个经典的核定位信号。这使得Bcl3即使不结合NF-κB，也能被转运入核。
慢病毒感染快速指南
1.将目的细胞按30%汇合度接种到24孔板，约3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为5×104为例，加入500uL完全培养基进行细胞培养。
2.接种后12-20h感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。
3. 加病毒量计算方法：（细胞数×MOI值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。同时加入Polybrene，每孔加0.25uL，浓度为10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为5ug/mL。
病毒液滴度（TU/mL） | MOI=10（uL） | MOI=20（uL） | MOI=40（uL） | MOI=80（uL） | MOI=100（uL） |
1×108TU/mL | 5uL | 10uL | 20uL | 40uL | 60ul |
4.感染16-20h后更换培养基，弃去培养基，每孔加入500uL新鲜的培养基。
5. 感染后48-96h显微镜观察荧光。（注：如果48h-96h期间细胞汇合度达到100%，请及时传代培养）。
6. 建议将48孔板细胞进行传代，传代12孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳MOI值。一般选择细胞生长良好，感染效率80%左右的感染条件作为最佳感染条件。（注：100%荧光感染不是细胞最佳MOI值，因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞正常生长状态）。
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